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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3846 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】:人副病毒1型PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Parainfluenza Virus 1(HPIV1)1RTPCR
【貨號】: BKP3846
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
人副病毒1型PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
滑膜細胞培養(yǎng)基SMIEFCATHODEBUFFER,20XIEF陰極緩沖液, 20X蛋白組學(xué)級透明淡黃色液體RTsigma
PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 1，3-本二流醇 1,3-BqNZqNqDITHIOL 66-04-0
人細胞;1301三拂醋工 Mqrcuric trifluoroccqtctq 1327-21-7
大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1 神經(jīng)上皮瘤細胞，SK-N-MC細胞 MPC細胞，小鼠垂體細胞4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷，英文名或英文縮寫：MUD，級別：BR，規(guī)格：100克
HT-29, 人細胞 Human617-45-8DL-天冬酸;DL-天冬酸;DL-天門冬酸;DL-基丁二酸;DL-基琥珀酸DL-Aspartic acid
SMMC-7721人細胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS吲哚美辛Indometacin質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR,BP2010
RSPO1 Protein Mouse 重組小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標簽)吲哚美辛（標準品）Indometacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
人平滑肌細胞 (HBSMC)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質(zhì)細胞 Mouse西米替汀Cimetidine質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,A型
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163西米替汀（標準品）Cimetidine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿德福韋/阿德福韋酯Adefovir dipivoxil質(zhì)量規(guī)格：>99%,可用于細胞培養(yǎng)
CM-H091人大隱內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate質(zhì)量規(guī)格：>95%,BC
GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤粉(>99%,BC)Lead powder質(zhì)量規(guī)格：>99%,BC
人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網(wǎng)膜微內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL堿式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
人平滑肌細胞總RNAHCSMC NA雷氏曼著色劑Leishman's stain質(zhì)量規(guī)格：BS
PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 來普霉素B 1%溶液Leptomycin B 1% soluton質(zhì)量規(guī)格：>95%(HPLC),BC
人副病毒1型PCR檢測試劑盒說明書大鼠腦細胞;C6SDS(wo7iumDODECYLSULFATE),10%SOLUTIONSDS溶液超級透明無色液體RTsigma
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡(luò)膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL二異脲酸鈉 dichloroisocyanurate,96% 2893-78-9 100G 通用試劑
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Humanα-1,6 葡聚糖 GLYCOGqN 9002-79-
EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照) 粘液素II，英文名或英文縮寫：Mucin，級別：BR，200u/mg，規(guī)格：1公斤
人紅系細胞;TF-1姆沙伯 W NAWChromosorb W-NAW
PCR檢測試劑盒
人副病毒1型PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
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